在樟油樟叶总黄酮含量（宝洁）N晁混合物在双波长分光光度法分光光度法测定在单一波长和的油总黄酮抗氧化在杆通过烘箱储存方法测定猪油和菜籽油。果表明，双波长分光光度法和单波长分光光度法可用于测定油脂中总黄酮含量。定性，精密度，重现性并且恢复双波长方法更好。脂油叶中的总黄酮含量为19-21mg / g。树叶总黄酮在猪油和菜籽油中具有一定的抗氧化活性，呈浓度依赖性。精油;黄酮类化合物;双波长分光光度法;脂质的抗氧化作用CLC编号：R284 1; 32 O657文献代码：AA商品编号：1002年至1302年（2015年）08-0308-03Huile [樟油樟（N Gamble的超]是属于埃希蚜科，在中国的单个汽油香料植物，主要生产四川省宜宾市：叶子富含芳香油，已成为香料，药品，日用和化学品的重要原料来源。2]主要基于芳香油提取石油资源床单，开发利用的同时，芳香油提取后的发展和残留物的利用率较低。年都有大量的叶子残留物被删除随意浪费资源但破坏生态平衡[3]。欧盟叶子中提取芳香油后的残留物calyptus具有多种生物活性，如抗菌[3]，抗癌[4]，抗炎[5]，镇痛[6]等。前，尚未报道提取芳香油后桉树油残留物的化学成分。黄酮具有多种生物活性，如抗氧化，抗肿瘤，抗癌，抗炎，镇痛，肝保护，抗菌，抗病毒，抗动脉硬化等，并广泛用于食品，化妆品，医药等领域[7]。黄酮具有抗脂质氧化显著效果：安全，天然类黄酮的植物提取替换合成抗氧化剂是含有油[8-9]油或食品添加剂的倾向。
研究通过双波长分光光度法测定石油覆盖叶片中总黄酮含量，并通过烘烤测定叶片的抗脂质活性，目的是为其提供依据。面开发和利用痰资源。料与方法1从四川省宜宾市翠屏区邱昌县油锄种植基地采集含桉树精油的叶子。丁标准（中国药品生物制品检定所，批号：100080-200707）;猪油（通过高温熔融制备），菜籽油（可商购的现场压榨机）不含任何添加剂;其他化学试剂具有分析质量。AL204电子秤（梅特勒 - 托利多仪器有限公司）;双光束紫外 - 可见分光光度计TU-1901（北京浦分析，通用仪器有限公司）;旋转蒸发仪RE-52AA（上海亚荣生化仪器厂）;真空冷冻干燥机LG-5A（上海离心机械研究所;）; HH4恒显水浴（金坛市正基仪器有限公司）。2方法2 1中的桉树叶总黄酮的提取物于蒸馏水桉树叶3小时，以除去芳族油，残余物在60℃下进行干燥和粉末，并用于桉树叶粉末，油60-80目。程30〜60℃）索氏提取1个小时脱脂，在60℃下干燥残余物，称重10克脱脂桉树叶的粉末中，添加300ml乙醇以70％的体积分数，在80℃水浴中回流8小时，过滤提取液中的浓缩物，加入100ml水溶解，用100ml石油醚萃取，使水层达到500的体积。桉树油叶中获得黄酮类化合物样品的总流体，并使用体积分数为85％的乙醇溶液。糖，蛋白质，单宁等将其作为沉淀物除去，过滤，将滤液减压浓缩成稠糊状物，并在真空下冻干，从油状片中得到粗制黄酮类化合物。2 2建立标准曲线2 2 1制备芦丁标准溶液的在120℃下，放置在50毫升的容量瓶中准确称量100毫克干燥至恒重芦丁标准的和添加的70的溶液％乙醇。解，稀释至70％的乙醇的刻度，摇匀，得到芦丁的标准溶液至2毫克/毫升，用冰箱中4℃下2 2 2彩色显影系统和方法确定参考中国医学的方法对总黄酮的测定中国药典[10]的花，使用彩色显影系统的NaNO 2 - 铝（NO3）3-NaOH，将显色，准确提取不同量的标准芦丁溶液。者，放置在25毫升的容量瓶中样品溶液，加入60毫升水，6分钟期间添加的亚硝酸钠5％，1毫升，混合，放置的溶液中，添加10％AI的溶液（3）3 1 ml，摇匀，放置以10ml使用相应的试剂空白作为溶液添加6mol / L的NaOH溶液中6分钟，加水至刻度，摇匀，和放置15分钟测量不同波长吸光度的参考。2 2 3分别测定波长和参比波长，取3 ml标准芦丁溶液和3 ml样品测定溶液，颜色按照将上述显色方法和试剂空白用作参比溶液，其范围为400-700nm。于光谱扫描，选择标准溶液和样品溶液的有色溶液的最大共同吸收波长作为测量波长，并选择波长在某一点的波长。择最大吸收波长作为参考波长[11]。
2 2 4标准曲线的制备在吸收容量瓶10，20，30，40，50％，60 ml至25毫升准确标准葡糖苷的溶液，然后使用确定的颜色发展的方法以下的颜色-Dessus。波长和参考波长处测量吸光度，并获得吸光度差ΔD（测量波长D-参考波长D），并且AD是在纵坐标上绘制，在横坐标上绘制质量浓度C（mg / mL），绘制标准曲线以获得线性回归。程。单一波长下通过分光光度法测量测量波长处的测量值。2 3颜色稳定性测试：将样品溶液移取到2 mL至25 mL的容量瓶中，根据上述显色方法染色，然后测量离开后的吸光度差异环境温度为0，30，60，90，120和150分钟。ΔD，计算RSD的值。2 4精密测试将3 ml样品溶液准确吸入5个25 ml容量瓶中。据上述显色方法显色后，确定吸光度差ΔD并计算RSD值。2 5重复性测试准确称取5克脱脂桉树叶粉，总共5份根据桉树叶的总黄酮的提取方法和测色方法中，确定分别测量吸光度差ΔD并计算RSD值。2 6通过添加回收试验准确吸收3毫升在三个25毫升的容量瓶中样品溶液的已知浓度的，加入1ml芦丁标准溶液和发展了色差根据下面的染色法以上确定吸光度差ΔD根据标准曲线计算溶液浓度，得到平均回收率和RSD值。定样品溶液在25 ml容量瓶中吸取准确的3 ml样品溶液。
据上述显色方法显色后，确定吸光度的差异。ΔD，根据校准曲线的回归方程计算样品中总黄酮含量，重复测定5次。2 8抗油氧化试验由烘箱保存试验方法[12]确定，在装有50毫升碘的瓶子中称重30克猪油或菜籽油，具体取决于数值以下：0 08％，016％，0 32％，0 64％。质量％计的百分比加入到桉树叶的原始黄酮，用0％02 2，6-二 - 叔丁基 - 对甲酚（BHT）和0 08％抗坏血酸（维生素C ）作为阳性对照，用纯猪油或菜籽油作为空白对照。制，热量和在70℃下30分钟搅拌，拌匀，在（70±1）℃下的烘箱中放置，搅拌，每12小时，一次在位置的变化four.Voir GB / T 5009 37 -2003每24小时一次。定油样的过氧化值（POV）的方法通过“食用植物油的卫生标准的分析方法”部分中规定的方法确定。时，BHT用作协同增效剂，根据油样的质量分别在油样中加入油黄酮和BHT，分别为0 16％和0.02％用于协同抗氧化试验。GB 10146-2005“食用动物油卫生标准”，GB / T 5538-2005“动植物油脂过氧化值的测定”。于猪油和菜籽油的POV的规定限定了猪油和菜籽油的氧化终点POV等于0.2g / 100g。肪和油的氧化过程被分类在第一级反应和反应式为：[JZ] LNC = -kt lnC0。中：C是油氧化后的过氧化物指数，C0是脂肪的初始过氧化物指数，k是恒定速度，t是时间。
据该等式，确定油的氧化速率常数k，并且当油的POV达到0.2g / 100g时的氧化诱导时间由回归方程。氧化保护因子（PF）是添加的油的氧化诱导时间与抗氧化剂的比率和初榨油的氧化诱导时间的比率，表明抗氧化剂的抗氧化性。氧化剂强，PF越高，抗氧化作用越强。价标准为PF = 1，无抗氧化作用; 2≥PF> 1，具有一定的抗氧化作用; 3≥PF> 2，具有明显的抗氧化作用; PF> 3，具有重要的抗氧化作用[13-14]。果与分析1总黄酮含量的测定如图1所示，芦丁标准品的最大吸收波长为510 nm，溶液的最大吸收波长为将样品在490nm处转变为蓝色，这是由于差异。他干扰成分的存在导致吸收波长向蓝色移动。据双波长分光光度法的波长选择原理[15]，样品溶液在510 nm处也有很强的吸收，选择510 nm作为测量波长，在585nm处选择芦丁标准物的下端和吸收曲线的交叉处的吸收点。考波长。光光度法在两个波长和在单一波长的分光光度法已被用来确定芦丁的标准曲线的回归方程的R 2至0999 2，0999 3，
香樟树其是相似的在0.008-0.0880mg / ml的浓度范围内可见。
种方法均确定芦丁的线性良好（图2）。波长法和单波长法的显色稳定性在0-150分钟之间变化很大，样品溶液的RSD吸光度分别为7 48％和7％。于样品溶液的RSD吸光度，98％和0至60分钟。51％和4，91％显示，在油性杆的叶片的总类黄酮中0到60分钟的这两种方法的发展couleur.La稳定性之间确定是好的，但的双倍长度的方法波浪优于单波长方法。密度，重现性和峰回收率实验表明，双波长方法的RSD低于单波长方法，但两种方法的RSD均小于5％并且标准添加的平均回收率分别为92 23％和90 11％。以看出，油茎叶中总黄酮的稳定性，精密度，重现性和回收率的测定优于单波长方法。个波长比单波长方法更准确可靠。过双波长分光光度法以19 21mg / g测定总脱脂油黄酮提取物的总黄酮含量，其低于单波长法测量的总黄酮含量。（20至18mg / g）（表1）。过醇提取得到10g脱油的桉树叶，得到382mg粗制黄酮类化合物，双波长法纯度为3587mg / g。崇禄及其同事用正交试验研究了从香樟叶中提取总黄酮的过程。酮类化合物含量为39 68 mg / g [16]，高于本实验中制备的含量。性桉叶叶片中总黄酮含量表明，从油性茎叶中提取总黄酮的过程值得加深。2抗脂质氧化试验如图3和图4所示，一旦鲸脂和菜籽油在高温下加速，各组的POV值逐渐增加，氧化时间。菜籽油和猪油中加入不同浓度的粗黄酮类化合物后，抗氧化油样品的POV值同时低于对照组。时，随着油页中原油总黄酮总量的增加，油样的POV值逐渐降低。
2显示，添加抗氧化剂后，油样的氧化诱导时间和PF值高于纯初榨油控制的PF值和PF值在测试的浓度范围内的抗氧化剂均大于1且小于2，并且在猪油上可见桉树油的粗黄酮类化合物。种菜籽油都具有一定的抗氧化活性，并具有明显的剂量 - 效应关系。猪油和菜籽油总黄酮高粱0 08％具有类似于维生素C FP 0 08％，但更小的值，这表明当原料黄酮在叶片的总量桉树达到0 08％，它在猪油上。
籽油的抗氧化活性与维生素C相当，但活性低。总猪油黄酮0〜32％的PF值是相似的0 02％的BHT，而总黄酮从0至16％的油菜籽的PF值是相似的0 02％BHT表明油性牡蛎的总黄酮类抗油。化活性相当于0.02％BHT，猪油中添加量必须达到032％，菜籽油中添加量必须达到0.16％。加入到油桉叶总黄酮高于0.2％，而猪油和菜子油的抗氧化活性大于02％BHT。黄酮在油料种子粉的低浓度比菜籽油，和高浓度（0 64％）反对的低，这表明总黄酮在含油鲤鱼低浓度过对菜籽油有很好的抗氧化作用。猪油中，添加到猪油中的高浓度优于菜籽油。
论和样品中总黄酮的讨论测定比色系统的NaNO 2 - 铝（NO3）3 - 氢氧化钠是courante.Pour更复杂的样品溶液，测定方法以单一波长，以产生容易干扰和双波长测量方法可以消除共存。件干扰可以提高可靠性[15，17]。验结果表明，双波长分光光度法和单波长分光光度法的稳定性，准确性，重现性和回收率均较好，两种方法均可用于测定。树叶中总黄酮的含量。而，单波长测量方法的稳定性，准确性，再现性和恢复值优于双波长测量方法。黄酮含量样品大于双波长方法，这可能是由于从油鲤中提取总黄酮。体含有许多影响颜色反应系统的其他干扰成分，导致单波长方法的可靠性低和测量结果高[18]。开发出计量液体的颜色后，与标准钌溶液相比，总螨类黄酮提取物的吸收光谱略微偏移蓝色，这也表明油杆可能含有更多会干扰吸收的成分。此，对于桉树油片的提取物的总黄酮含量的测定，双波长方法可以更好地消除背景干扰，如复杂的组件，所述单波长法。肪油叶总黄酮含量脱脂21是通过分光光度法双倍长度onde.Les结果19毫克/克是准确和可靠的，并且可以用来作为测定总黄酮的在叶片的方法桉树油。酮类化合物通过消除金属离子（如铁和铜）的催化作用，可以增强氧化反应的活化能，从而阻碍氧化反应，并为其提供氢。肪基（R·）和过氧化物基（ROO·）。转化为酚基（A·），分别形成脂肪分子（RH）和氢过氧化物（ROOH）。酚自由基可以降低自氧化链反应的速率并抑制随后的油氧化[18]。验结果表明，桉树叶中总黄酮对猪油和菜籽油具有一定的抗氧化作用，具有剂量 - 效应关系。0 08％维生素C对猪油和菜籽油的抗氧化活性低，可能是因为维生素C是一种水溶性抗氧化剂，在油脂中溶解度低，低有效浓度导致低抗氧化活性。
黄酮0 32％和02％0 BHT对猪油相同的抗氧化作用，总黄酮0 16％和02％0 BHT具有等效油菜籽油的抗氧化作用，当总黄酮桉树叶高达0 32％，对猪油和菜籽油的抗氧化活性高于02％BHT。粱和BHT的总黄酮的组合使用允许协同的抗机会和抗菜籽油氧化。
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