目的比较中华鳖(O. chinensis)与中华鳖(A. sinensis)的物种同源性,进行质量控制研究。法樟芝和A的HPLC印迹。用Diamonsil C18柱(2)(250 mm x 4.6 mm,5μm),乙腈-1%甲酸作为流动相梯度洗脱,流速为0.8 mL建立Sinensis。/ min,检测波长为254nm,柱温30℃结果共同樟芝和Shenzhizhizhi已经确定新的HPLC指纹图谱:的樟芝11批相似性为0.906和0.995之间10个深植之治的相似度在0.956和0.998之间。论该方法简便,重复性好:HPLC指纹图谱和樟芝和A的红外光谱。Sinensis有一些相似之处。芝(Antrodia camphorata);指纹;液相色谱高性能DOI:10.3969 / j.issn.1005-5304.2017.08.019分类号:R284.1文献代码:A文章编号:1005-5304(2017)的同源性的08-0085-04Étude两种类型的牛樟芝王宏云1中,Gong2王,俞琳楚科丹,徐炜,李Huang1(1.药学院,中国中医药大学在福建,福州的种类和质量控制350122,香樟树摘要; ..比较和研究两类牛樟芝的实现对质量控制方法研究的物种同源性的方法两种类型的牛樟芝的HPLC指纹是HPLC指纹图谱在Diamonsil C18柱(2)(250 mm x 4.6 mm,5μm)上用流动相洗脱,流动相由1%甲酸和梯度乙腈的溶液组成,流速为0.8mL / min,检测波长设定为254n米;柱温为30℃。果HPLC指纹牛樟芝表明9个共有峰,相似性范围从0.906至0.995和0.956至0.998在11批次两种类型的10批Antrodia Cinnamomea,分别结论结论该方法简单,重复性好。表明HPLC和红外指纹在两种类型的牛樟芝中具有相似性:关键词:牛樟芝(Antrodia Cinnamomea);指纹; HPLC牛樟芝,也称为樟芝,牡蛎蘑菇等。草腐朽的内墙。在中国台湾省生产,是一种有价值的药用蘑菇。“中药蘑菇”表明牛蒡具有抗肿瘤,抗氧化,抗炎作用[1]。究表明,樟芝主要含有三萜类化合物,多糖,腺苷等成分[2],降糖药[3],肝脏保护[4-5]和疲劳[ 6]等效果。而,在自然界,牛蒡已经被广泛地出手,甚至威胁到extinction.Il被列为台湾和野生牛蒡物种保护树木的生长环境的要求很高,而且速度增长缓慢,因此产量低。年来,人工种植了樟芝技术,其中通过切片木材种植方法获得的产品与樟芝的野生成分非常相似[2,7-9] ],但分段木材栽培方法也将提交给主办方。蒡资源号基金项目:福建省新兴产业特殊战略发展(2013)通讯作者:徐伟,E-mail:限量金额为xwfjtcm@sina.com。水之芝是樟芝的新宿主,选自樟树的人工培养。水鱼主要分布在台湾,福建,广东,广西,湖南,江西和越南北部,资源相对丰富。

研究采用指纹图谱和红外高效液相色谱法分析了樟芝与深植之智的相似性,探讨了两种物种的同源性,并进行了质量控制。器和试剂Ultimate 3000高效液相色谱,Thermo Fisher Scientific; Diamonsil C18柱(2)(250 mm×4.6 mm,5μm),DIKMA公司;电子秤,梅特勒 - 托利多; CNC KQ-500DE超声波清洗机,昆山超声波仪器有限公司;冷冻干燥机,基督;傅立叶变换红外光谱仪,Thermo Fisher Scientific。腈和甲酸都是色谱纯的。关牛芝芝和神水安芝芝样本来源的资料见表1.他由福建中医药学院皇宫研究员鉴定并留在他的大学。医药检验中心。谱条件柱:Diamonsil C18柱(2)(250mm×4.6mm,5μm);检测波长:254 nm;流速:0.8 mL / min;柱温:30°C;注射浓度:20 mg / min mL;注射量:10μL;采集时间:80分钟;流动相由乙腈-1%甲酸水组成,梯度洗脱过程如表2所示。验溶液的制备取约0.6 g的Antrodia粉末样品将樟脑精密称重,置于锥形瓶中,补充9ml 95%乙醇,超声提取40分钟(功率500W,频率40kHz),过滤,然后过滤残留物加入9ml 95%乙醇,以相同方式萃取两次,合并滤液。溶剂在60℃水浴中蒸发,将残余物溶于95%乙醇中,转移至10ml容量瓶中,加入95%乙醇中。匀,取1 mL容量溶液,加入2 mL 95%乙醇,过滤0.22μm微孔膜。

相同的方法制备芦笋溶液。法学调查精密度试验取同一批樟芝(N1)和参芝止智(C1)的同一试验溶液,在“2.1”条件下连续6次注入样品,检测特征指纹。果表明,各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积基本一致,RSD小于3.0%,符合指纹技术要求。于稳定性试验,取同一批樟芝(N1)和深水芝芝(C1)的试验溶液,在0,2,4,8,12检测特征指纹,根据“2.1”中指出的条件24小时。

谱结果表明,各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积基本相同,RSD小于3.0%,表明试验溶液稳定在24小时。于再现性测试,相同批次樟芝(N1)和Shenzhizhizhi(C1)的样品取出并制备六个样品根据方法“2.2”,然后“2.1”下所描述的条件下注入。纹。果表明,各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积基本相同,RSD小于3.0%,符合要求。

据方法“2.2”对11批樟芝和10批芷芝样品进行取样,然后在“2.1”的色谱条件下注入,制备样品,并记录色谱图。2指纹的建立公共峰的确认根据11批樟芝的HPLC指纹图谱给出的参数,每批共享10个峰。定这些10个峰为樟芝不同批次的共同峰值,如图3所示。样,确定峰值11是Shenzhizhizhi的不同批次的共同峰,如图。4.通过比较指纹樟芝和Shenzhizhizhi,人们发现,神水芝芝很少包含图3铌芝芝的峰值7中几乎不含有峰3“和4”的图4和删除了三个无与伦比的高峰。种樟芝(Antrodia camphorata)获得了9个共同的峰。纹樟芝和Shenzhizhizhi的相似性的评价是在“2.1”的色谱条件下进行建立的樟芝11个批次和Shenzhizhizhi的10批HPLC指纹。地图被导入2012年中医药系统版。件,建立了樟芝和深水芷芝的共同指纹图谱(图3,图4)。用共识模型作为对照指纹,计算了11批樟芝与对照指纹的相似性以及10批神之志指纹与对照的相似性。果显示在表3中。外光谱分析样品制备根据“2.2”的方法提取樟芝和A. sinense的提取物。用冷冻干燥器干燥提取物并通过100目筛网;将溴化钾细磨并通过100目筛。样品和溴化钾在恒重烘箱中干燥。描方案将样品粉末与溴化钾粉末混合(溴化钾与样品量的比例为100:3),在玛瑙基砂浆中粉碎并压缩。描条件:光谱范围为400-4000 cm-1,扫描次数为16次,OPD速度为0.2 cm-1 / s。描样品后立即收集背景。得样品的红外光谱,看到的结果在IR光谱的图5.分析,有樟芝和Shenzhizhizhi,主要区别在于之间没有差异显著1675 1500之间和CM-1,其拉伸振动C = C和C = N引起。设樟芝和芦笋中含有的化学基团类型基本相同。论本实验研究了水,甲醇和95%乙醇作为样品提取溶剂,并参考了相关文献[10]。果显示95%乙醇具有最高的提取率,最后选择95%的乙醇作为提取溶剂。该实验中,研究了四种流动相系统甲醇 - 水,乙腈 - 水,1%甲醇 - 甲酸水和1%乙腈 - 甲酸。果表明,乙腈-1%甲酸流动相体系具有较高的每个峰分辨率和稳定的基线,最终乙腈-1%甲酸水体系最终用作流动相系统。录200 min的色谱峰,80 min后观察峰。果表明,80 min后光谱中有3个峰。留时间分别为92,103,135 min,但峰面积很小,均在10的范围内,对整个色谱条件的影响很小,因此决定缩短检测时间。过对峰的紫外区域进行全波长扫描,我们发现254 nm处的峰值最高,峰值被很好地吸收,分离效果良好,这就是为什么检测波长为254nm。批樟芝的相似性范围为0.906至0.995。灵之治10批次的相似度在0.956~0.998之间,0.9~1.0之间,与指纹图谱的发展条件一致。稳定。于牛芝芝未在中华人民共和国药典中注册,市场上没有相应的参考物质,参考物质的制备成本太高,因此特定成分不会没有定性和定量测试。较每批樟芝和A的足迹。Sinense和相应的控制指纹,已经确定,虽然两种物种A.中华不同,色谱峰的类型基本相同。于具有相同保留时间的峰,樟芝样品的每个色谱峰的峰面积通常大于樟芝样品的相应峰面积,除了樟芝3号和4号。面积略小于或近似等于相应的浸没枳实的5和6峰。
樟芝属于两个不同的物种樟芝:假定大部分樟芝的化学成分都包含在Shenzhizhizhi,但有些组件具有相对较小的含量和成分几乎相等。于生长环境恶劣和增长缓慢,牛蒡很少见。樟芝药效学的实验研究表明,它可以抵抗炎症[11]并抑制肿瘤细胞的生长[12]。管樟芝有许多有益效果,但它受资源量的限制,不能大规模使用。
据本研究的指纹图谱,中华猕猴桃中色谱峰的数量和保留时间与樟芝几乎相同,只有峰面积不同,表明神水Zhizhi和Antrodia camphorata有很大的相似之处。芝和深水芷芝属同一品种,深水安芝是肾朔树而不是牛蒡的寄主。

论是否能用于替代樟芝(Antrodia camphorata),都需要对活性成分和药效学进行进一步的研究。
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