作为一种稀有的食用和药用蘑菇，樟芝具有很大的发展潜力。这项研究中，狭叶A.的菌丝体在搅拌下生长60天后的肉汤液体培养基浸渍的麦芽（BD，BD，USA），和发酵液收获，并用乙酸乙酯萃取乙酸并浓缩至干，得到提取物;同时，13种致病菌培养物的抗菌活性通过抑制区（蜡状芽孢杆菌，地衣芽孢杆菌，无乳链球菌，短小芽孢杆菌，痢疾杆菌，枯草芽孢杆菌，金黄色）的方法进行评价。萄球菌，藤黄微球菌，副溶血弧菌，金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌，甲型副伤寒沙门菌，大肠杆菌和相应的病原菌的最低抑制浓度（MIC））。果表明，樟芝麦芽发酵肉汤提取液中的提取物对13种测试细菌病原体的抗菌活性，特别是针对迟缓芽孢杆菌和短小芽孢杆菌。枯草芽孢杆菌，副溶血性弧菌和藤黄微球菌的5种致病菌的最小抑制浓度是小于80微克·×1和藤黄微球菌的最低抑菌浓度为66.5微克·×1;随着培养时间的增加，提取物的抗菌活性也增加。表明，樟芝菌丝体可产生具有抑菌广谱和高效率在液体培养条件下的次级代谢产物。究结果为更有效地利用铌奠定了理论基础。芪菌丝稀有药用蘑菇，抑制区的方法，最低抑菌浓度，病原菌分类号：Q946文件号：AA项目编号（2017）总结：牛樟芝是一个极其食用药物。菇具有很高的潜在价值。该研究中，选择基于麦芽提取物的液体肉汤培养基用于A.cinnamomea菌丝体培养物。A. cinnamomea的菌丝体在液体麦芽提取物中以150rpm培养60天。过提取A获得初级提取物。皮用乙酸乙酯萃取，而抑制的接种区是用来评估初级和最小抑制浓度提取物（MIC）的抗菌活性测定，以及A的初级提取物肉桂在培养中。肉汤液体麦芽提取物，抗菌活性为显著VIS-à-VIS的13种致病细菌（蜡状芽孢杆菌，迟缓芽孢杆菌，无乳链球菌Streptcococcus，短小芽孢杆菌，痢疾杆菌，枯草芽孢杆菌，的存在各种细菌（迟缓芽孢杆菌，短小芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，副溶血弧菌，藤黄微球菌）对藤黄微球菌牛樟芝萃取的最低MIC的为66.5微克·毫升1的时间的影响在抗菌活性培养物也détectée.Les结果表明，菌丝体培养牛樟芝的抗菌活性是从增加菌丝。皮可在液体培养基中生长，并且能够产生有效成分该发现为A. cinnamomea的开发和利用提供了信息。键词：牛樟芝肉桂菌丝体一，食用药用蘑菇，接种抑制区域，最低抑菌浓度，病原菌牛樟芝是可食用蘑菇稀有和药用，樟芝，柱状田头菇，棉蚜的名义下也是已知的，属于担子菌亚门乳杆菌，不侧耳，多孔菌科，Porphyraceae（胡股等等，2006年）。蒡因其牛蒡树上的寄生虫而得名（Geethangili等，2011）。台湾，牛樟芝经常被用来镇静舒缓fatigue.En此外，牛樟芝也具有免疫调节和保护肝脏。台湾，铌被称为“红宝石森林”（Chen Tiqiang et al。2003，Zhang Yihong）。等，2015;赵能等，2016）。年来，Lin等人（2006）显示，樟芝的药用价值远远高于它的食用价值：它不仅可以作为保健食品，以增强人体抵抗力，保护肝脏，还应对腹泻，腹痛，高血压等各种疾病也在抗击癌症方面发挥作用。Chen等人（2003）的一项初步研究表明，A体内的三萜类化合物含量很高。
Annuum达到63％。Geethangili等人（2010）分离并鉴定来自樟芝78种化合物，和78种化合物的39是三萜类化合物。多数三萜类化合物具有抗炎和抗癌作用（Peek等，2002）。统医学认为主要是樟芝子实体，但由于牛樟芝和其不同寻常的主机的增长缓慢，野果Niuzhangzhi的身体可以应付的有效成分目前的科研需要樟芝（Antrodia camphorata）。
此，牛樟芝樟脑市场的野生子实体的价格是每公斤（Lu等，2014）美元15 000和25 000之间。Du等人（2012）发现，通过在发酵培养深度樟芝三萜类化合物的含量为10〜30倍野生樟芝，其提供了一种新的感觉为樟芝和文化的获得有效成分。芝具有成熟子实体虽然它们是由菌丝体，但它被发现，菌丝体和子实体的活性成分具有不同的效果（Lu等，2013）。毒性副作用抗癌药物在樟芝，Antroquinonol，有效的抗癌物质的仅在发现菌丝菌丝被发现，但在子实体未检测到（DER等人，2006）。于野生樟芝的资源微薄，文献和专利中已经讨论了各种培养方法和培养配方。究人员开发了四种主要的培养方法：深层发酵，固体培养，切割木材培养和平面培养。
中，桉树种植也面临着资源牛蒡短缺，但没有其他植物种类，可替换牛蒡不影响牛蒡的活性成分被发现。固体支持培养和培养皿培养方法相比，可以相对容易地相对容易地培养发酵培养物。过发酵，它不仅可以通过改变环境，生长条件和耕作方法（Lu等，2013），以获得由野生菌丝菌丝生长速率和产物的活性化合物，也新的活性和活性物质。此，通过发酵培养樟芝具有很大的潜力。为食用菌，牛樟芝含有大量具有抗肿瘤作用，抗炎等活性成份，但是目前有对抗菌活性的报道很少。Geethangili等人（2010）发现，樟芝的果实提取物抑制引起胃炎幽门螺旋杆菌，和Link等（2013）还发现，样品。Angustifolia对口腔细菌有抑制作用。前，樟芝发酵液提取物尚无抗菌活性报道。这项研究中，樟芝的菌丝体通过发酵在摇床中生长，获得发酵液的提取物并检测提取物的抗菌活性，它不仅能够迅速地开发樟芝菌丝体，也可以回收实际使用。芝菌丝体位于基地。料与方法材料与试剂菌丝体：牛蒡茎由昆明食用菌研究所提供。过ITS，β微管蛋白基因片段和1α延伸因子基因片段进行菌株鉴定。体方法是提取菌丝体DNA，使用通用引物，以获得基因片段的PCR扩增，然后进行双向测序和测序的结果与中华稻蝗的已知序列进行比较NCBI确定获得的菌株是樟芝（Antrodia camphorata）。时，通过菌丝观察和菌丝染色检查，菌株命名为AC001。状芽孢杆菌（BC），迟缓芽孢杆菌（BL），无乳链球菌Streptcococcus（SAG），短小芽孢杆菌（BP），弗氏志贺菌（SF），枯草芽孢杆菌（BS），葡萄球菌：在抗菌实验中使用的病原体黄色葡萄球菌（SAU），藤黄微球菌（ML），副溶血性弧菌（副溶血性弧菌，VP），溶血葡萄球菌（SH），铜绿假单胞菌（PA），乙型副伤寒沙门氏菌（SP），大肠杆菌EC）。昆明市食品药品检验所主办。养基：麦芽提取物肉汤（US，BD）。法通过激活A制备固体PDA培养基。
Faecalis.Après灭菌和冷却在无菌条件下，亲本种子在倾斜平台分别挂并在25℃的恒温培养，菌丝体覆盖有倾斜表面和用于细菌。丝的液体培养。养菌丝黄芪培养物通过灭菌100ml液体培养基的由浸渍麦芽肉汤培养基（美国，BD）的指示制备。后加入1g菌丝黄芪物接种到在150转/分1与麦芽和培养浸渍在25℃下60天在摇床肉汤液体培养基。有在培养物中制备的抗菌活性的物质可以是具有羟基和提取酚物质，获得的培养物过滤后，调整为2的pH值是的提取有利酚类物质（Chiang等，2013）。酸乙酯以1:1的体积比添加：1，并且将混合物振摇，30分钟超声处理两次，并倒入分液漏斗中静置过夜。水相排出，浓缩上层的乙酸乙酯层用旋转蒸发器称量，加入1ml二甲基亚砜（DMSO）中后浓缩至干。取所述提取物中制备的试验菌株的悬浮液的活性：13种致病菌固体肉汤的中间接种并在37℃下24小时。用接种钩在其上的应变梯度被激活时，培养基的表面上拾取所述细菌，加入无菌生理盐水溶液，均匀地混合到轧机和调节细菌悬浮液的浓度在1×106×6×106 cfu。
·ML1。菌测试：准备固体的Luria Bertani培养基，倒入尚未在20ml凉爽灭菌后凝结在培养皿中的培养基，并固化和固体培养基上添加250升的各细菌悬浮液的小滴。基板表面均匀地用无菌棉签覆盖，以制备含有细菌的板，并且每个应变重复3次（Fang等人，2014）。用的纸张的方法（荡约访等人，2014; ..君Wang等人，2013），滤纸盘5毫米的直径通过高压灭菌干燥，并加入10微升试验溶液并测试过。为样品的阴性对照，该DMSO溶液置于用无菌镊子每个培养皿的表面上，并且培养皿加盖并在37℃下24小时。定最小抑制活性（MIC）：相应的活性提取物的MIC值用稀释法测定两次（Link等人，2013;照弥嗯等人，2011年）。
抗菌活性培养物不同的持续时间的影响通过制备100ml的麦芽提取物的液体培养基的12瓶确定，每组3瓶放置在25℃，速度为150转/在振动筛中分钟。40，50，60天，pH通过在1.2.3中描述的方法调节至2，然后加入乙酸乙酯以1:1的体积比的：1，通过搅拌，超声波2次混合30分钟后倒入分液漏斗中。压后，排出水相。后，提取两次连续水相后，将乙酸乙酯萃取层合并并浓缩使用旋转蒸发器至干燥，然后溶解于1ml的DMSO中用于检测活动。计数据的抑菌圈的直径和MIC 1.2.1的值1.2.5确定被包括在Excel和之后的表列已经建立。果和讨论试验溶液的麦芽提取物肉汤的培养提取物的浓度，萃取，并用乙酸乙酯（100毫升），最后22.6毫克的干燥获得干燥的提取物，将其完全溶解在1ml的DMSO中。麦芽浸渍肉汤发酵肉汤提取物的活性接种到肉汤培养基浸渍的麦芽，而抗菌活性通过13种致病菌筛选。菌活性在图1中示出在介质BD生长的发酵肉汤提取物黄芪菌丝的抗菌活性是非常明显的，并且具有抗菌广谱活性。BD肉汤提取物对福氏志贺菌和大肠杆菌具有最佳抑制作用。制作用最弱，对其他致病菌的抑制作用相对较近。报道，樟芝菌丝体用麦芽浸泡肉汤培养基培养能产生抗菌活性物质。IJC提取物的麦芽提取液肉汤MIC值被用于确定用于制备与相应的致病细菌的溶液中的BD介质的MIC值，并且将结果显示在图图2：示出了相应的病原体，其MIC值> 1毫克·×1和图2的B显示了相应的病原体，其MIC值<1毫克·×1。13种致病细菌，有5 CMI超过1毫克·×1，和其他8种病原体有MIC值小于1mg·×1和MIC被最高为金黄色葡萄球菌，指示金黄色葡萄球菌是BD。在中间樟芝的菌丝体得到的提取物是不敏感和ML的MIC值是最小的，表明发酵液提取BD对良好的抑制效果藤黄微球菌。的MIC等于13个致病细菌，芽孢杆菌MIC迟缓，短小芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，藤黄微球菌和副溶血性弧菌都小于80微克·×1。
BD培养基中获得的发酵液提取物对五种病原菌具有强烈的抑制作用。养时间对抑菌的筛选这项研究工作的经验2.2的结果，只能从BD中期获得的发酵液中提取活跃。此，选择液体培养基BD用于樟芝菌丝体的时间梯度培养。酵液提取物在不同时间的抗菌活性如图2所示。3.这是从图3显而易见的是，从在BD BD液体培养基中的液体介质中得到的发酵液的提取物的抑菌活性是显著不同，这取决于培养时间。培养物持续20天时，提取物几乎没有活性，只有它对蜡状芽孢杆菌的抑制活性低。
养40天，提取物有可能对所测试的所有细菌的抑制活性，虽然他对每个受试菌有很好的抗菌活性。培养金黄色葡萄球菌，短小芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌和甲型副伤寒沙门菌的不同时期获得的提取物的抑制效果在40天之后呈指数上升和弗氏志贺菌的抑制作用为40天。长速率在40至50天之前基本上增加，但对其他8种病原体的抑制作用显示梯度增加。表明，在抗菌作用的活性成分应在60天内逐渐增加，大多数病原菌，可以抑制当培养60天。3讨论和结论在该研究中，常见的致病性细菌在13种类型的食品的活性使用樟芝发酵液的提取物进行分析，抗菌活性为显著抗菌活性显着，抗菌活性与培养期有关。加量增加。这项研究中，除了使用液体麦芽肉汤培养基为冷杉菌丝体的培养和其他8个媒体（葡萄糖淀粉，马铃薯基板和蔗糖，酵母介质和蛋白胨，胰蛋白胨大豆肉汤，营养肉）汤，沙氏液体培养基葡萄糖，乳糖 - 蛋白胨培养基，酵母麦芽提取物的培养液）培养已在樟芝菌丝，但最终，仅从BD公司的麦芽肉汤中提取的发酵液提取物检测到细菌效应。于在液体培养基中生长BD A.沙枣菌丝体的次级代谢产物具有广谱抗菌活性，它是可能的，在未来的研究，考虑到分离和培养的大量有效的抗菌物质的单体的在这一个。漫画的次级代谢物的MIC测定，人们发现，初级提取物的MIC为80微克·×1，表明抗菌物质含量高。在各种液体介质樟芝菌丝体的活性的显著差异，这可以通过不同介质的去活或关键的基因的表达在A的菌丝体刺激所引起尼日尔，实际上可以促进樟芝菌丝体的表达。生次级活性代谢物。抑制樟芝菌丝，对金黄色葡萄球菌的抑制效果，枯草芽孢杆菌的培养物的活动的时间，铜绿假单胞菌和甲型副伤寒沙门菌后40天成倍增加。
因可能是控制合成抗菌物质的基因在最初的40天内没有表达。40天后，培养基中的某些物质被分解成其他物质，这些分解的物质就是基因的表达。物刺激基因本身的表达以产生相应的抑菌活性。9圆的，在液体培养基中培养BD樟芝只有次级代谢产物具有的抗菌活性，而其它8的次级代谢产物是不活跃，樟芝的菌丝体，但次生代谢产物。差是非常大的，并且可以通过在基因表达状态的差异是由于一些部件的在milieu.Cest的制剂中的差异所引起的第一份报告，从狭叶A.发酵液中提取具有显着的抗菌活性。深入樟芝发酵后的次生代谢产物的抗菌活性尚未迄今为止所报道，并樟芝的增长缓慢，子实体难以生长（过哩肿等。2011），其寄生虫寄生树强制性的，因为在台湾保护树种难以研究牛樟芝的抗菌活性芝成熟，
香樟树但樟芝菌丝体液态发酵培养，不仅可以快速增长的菌丝，而且还通过改变培养基组成，培养条件和添加酶抑制剂刺激蒽醌。外，也可以激活不同的合成基因组以获得具有新骨架和高活性的新化合物（伯德等人，2002; Berdy，2005）。此，这项研究不仅能快速增长的樟芝菌丝体，而且还回收樟芝菌丝体，奠定了有效使用樟芝菌丝体的基础。
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